柱層析填料主要包括常壓分離、減壓分離和加壓分離3種模式。常壓分離是簡單的分離模式方便、簡單，但是洗脫時(shí)間長。減壓分離盡管能節(jié)省填料的使用量，但是由于大量的空氣通過填料會使溶劑揮發(fā)，并且有時(shí)在柱子外面會有水汽凝結(jié)，以及有些易分解的化合物也難以得到，而且還必須同時(shí)使用水泵或真空泵抽氣。加壓分離可以加快淋洗劑的流動速度，縮短樣品的洗脫時(shí)間，是一種比較好的方法，與常壓柱類似，只不過外加壓力使淋洗液更快洗脫。壓力的提供可以是壓縮空氣，雙連球或者小氣泵等。

 

　　柱層析填料操作的一些建議：

　　1、使用前首先明確自己的分離目的，即要做哪一方面的分離，從而選擇合適的凝膠填料，尤其對于沒有成熟工藝的學(xué)生和研發(fā)人員，請大家務(wù)必查閱文獻(xiàn)或者詢問老師，同時(shí)根據(jù)自己的分離要求，選擇合適長度和直徑的層析柱；  

 

　　2、選擇好層析柱和填料以后，嚴(yán)格按照填料的要求來操作，包括填料的溶脹、脫氣、裝柱，期間務(wù)必嚴(yán)格按照說明書操作；

 

　　3、適當(dāng)控制上樣量,上樣以前務(wù)必要過0.22µm濾膜；

 

　　4、選擇合適的流動相，根據(jù)膠的性質(zhì)決定能否用泵加壓；

 

　　7、使用完畢后，請將層析柱做好處理，將層析柱堵好，以防干膠或者進(jìn)氣泡，同時(shí)請做好試驗(yàn)紀(jì)錄，以便下一位同學(xué)用時(shí)方便查詢使用情況；

 

　　8、試驗(yàn)過程中所有用水或者溶液必須經(jīng)過抽濾和脫氣，嚴(yán)防氣泡；

 

　　9、若在使用過程中發(fā)生意外情況。